大规模细胞培养应该如何高效进行？

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大规模细胞培养技术是指在人工条件下（设定ph、温度、溶氧等），在细胞生物反应器中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。目前可大规模培养的动物细胞已成功生产了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、红细胞生成素、单克隆抗体等产品。该技术经有了很大发展，从使用转瓶(rollerbottle)、CellCube等贴壁细胞培养，发展为生物反应器进行大规模细胞培养。

一种细胞大规模培养技术——细胞工厂，在疫苗行业已逐渐普及。这项技术拥有能降低污染风险，节省空间，表面有利于细胞贴附和生长，能较好的替代传统转瓶培养技术的优点，一定程度上弥补了之前技术的问题。

当然如何通过细胞工厂保持每一次操作的安全、一致、无污染，是需要重点考虑的问题。那么我们应该如何正确的操作细胞工厂呢？接下来，康宁3D细胞培养技术小编带大家了解具体的操作流程。

由于细胞工厂的培养特性，放大的最简单方式就是增加细胞工厂的数量。当细胞工厂数量增多时，我们就会遇到与使用细胞瓶培养时一样的麻烦——多次的开盖操作。随着开盖次数的增加，操作的时间会延长，污染的风险也会随之增高。为了解决这个问题，就可以用到一个很简单的方式，将细胞工厂从单个的单位组成一组，并且将开放的培养组件组合成一个密闭的系统。

如何操作
1.准备定制传液盖、培养基、细胞工厂、连接管路。
2.将传液盖与培养基瓶、细胞工厂与连接管路在A级环境下连接。
3.将传液盖与连接管路通过快接口连接，组成封闭系统。
4.进行传液操作，传液结束后，连接管路可以保留在细胞工厂上进行培养，以及供下一步的换液与传代操作使用。

1.变开放系统为密闭系统，降低污染风险

相信大家也组装过简单的管路用于培养基及其他缓冲液的传输，使用管路操作最显著的优点就是将细胞工厂的开放操作变为了密闭操作。培养基不在经过开放的环境，这样就能大大降低外界污染的风险，培养基瓶也可以通过定制的传液盖，在超净台中组装后与管路系统连接，实现密闭的传液。

2.多个细胞工厂串联，提高进出液速度

在使用单个管路连接细胞工厂时，过高的进液速度会导致细胞工厂的承受的压力增加，导致细胞工厂出现异响或者炸裂。这些压力是由于快速的液体流入，气体无法顺利排出导致的。一般来说，单个细胞工厂在不使用滤器改善通气条件的情况下。目前大家推荐的进液速度为3-4L/min。这样当大家使用管路将多个细胞工厂串联的时候，由于多个细胞工厂可以分担气体排出的压力，进液速度可以成倍增加，4个细胞工厂串联可以做到10-12/min的进液速度。这时进液就不再是操作的瓶颈了。

3.灵活的配置方案

常规的由小试向中试阶段过渡的操作可能在超净台中进行。在大生产的车间中，大家可能使用温室，定制的架子，或使用自动化设备进行操作。无论使用哪种布局方式，或者一次连接几个细胞工厂，目前的技术都可以根据需求，定制不同的连接方案，与不同的工艺紧密契合。

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